Data/hora: 19/05/2024 11:04:36

Biblioteca(s): | Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.
Data corrente: | 25/08/2004
Data da última atualização: | 20/10/2020
Autoria: | ROMANO, E.
Título: | Plantas transgênicas resistentes a viroses: obtenção e estudos de segregação não mendeliana.
Ano de publicação: | 2002
Fonte/Imprenta: | 2002.
Páginas: | 109 f.
Idioma: | Português
Notas: | Tese (Doutorado em Biologia Molecular)-Ciências Biológicas, Universidade de Brasília, Brasília. Orientador: Francisco José Lima Aragão.

Conteúdo:

Neste trabalho foram desenvolvidas plantas transgênicas de Solanum tuberosum (batata) resistentes as principais viroses desta cultura: o virus Y da batata (PVY) e o vírus do enrolamento d folha (PLRV). Para obtenção de resistência ao PLRV, o gene da replicase deste vírus foi clonado e a capacidade de expressão de proteína foi verificada em sistema de baculovírus. A partir desta replicase selvagem foi obtida uma replicase mutante sem capacidde de polimerização. Estes dois genes foram colocados sob o controle de dois promotores o 35 S e o de rolA gerando quatro construções em vetores binários para transformação e expressão em células vegetais. Mais de 150 plantas transgênicas foram obtidas e desafiadas contra o PLRV através da inoculação com afídios. Cinco plantas resistentes foram obtidas sendo que uma apresentando imunidade contra o vírus.
As plantas transgênicas resistentes ao PVY foram obtidas pela transformação com uma construção com o gene do capsídio. Um dos clones de batata com alta resistência ao PVY foi incorporado a um projeto da EMBRAPA que objetiva avaliar a segurança ambiental e alimentar de plantas transgênicas. Este clone é o primeiro protótipo transgênico desenvolvido pela EMBRAPA com potencial para comercialização. Também foram desenvolvidos três vetores binários com diferentes genes de seleção que permitem a realização de co-transformação e de transformação sequencial. Apesar do êxito na obtenção de plantas transgênicas resistentes as principais viroses da cultura, a proporção de clones com alta resistência foi bastante baixa.
Uma estratégia mais racional para obtenção de linhagens elite seria compreender e posteriormente controlar, os mecanismos que fazem com que estas poucas linhagens expressem os transgenes em altos níveis, e os transfiram corretamente para a progênie.
Seguindo este raciocínio, foi desenvolvida a segunda parte desta tese. O fenômeno de segregação não mendeliana foi estudado utilizando-se como modelo duas linhagens de feijão transgênicas, 27 e 158, resistentes a virus. Ambas apresentando uma enorme redução no número de plantas transgênicas nas progênies. Nossos estudos sugerem que a redução de transformantes nas progênies da planta 27 ocorreu devido principalmente a mutagênese insercional de genes envolvidos com a gametogênese e/ou embriogênese. Já a ausência completa de transformantes nas progênies da planta 158 é devido a um processo muito pouco descrito na literatura, a eliminação de transgenes. Nossos dados sugerem ainda que esta eliminação de transgenes não ocorreu de forma aleatória e sim como resultado de um processo de defesa da planta contra a invasão de DNAs exógenos. Recentemente foi reconhecido que eucariotes possuem um sistema de defesa genômico análogo ao sistema imunológico dos vertebrados. Este seria constituído por mecanismos de silenciamento pós-transcricionais mediados por RNAs interferentes (RNAi), e protegeria o genoma contra a ação mutagênica de DNAs exógenos como os transposons. Nossos dados sugerem que além de silenciamento pós-transcricional, eliminação de transgenes também pode fazer parte deste sistema de defesa genômico.

Thesagro: | Batata; Planta Transgênica; Resistência Genética; Vírus.
Categoria do assunto: | --
Registro original: | Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (CENARGEN)
Exemplares: | CENARGEN - (24347-1) - UPA - TS - -- - 2002/025 - ROM - 2002/025 - DIS